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病原病毒嚴(yán)重危害動植物以及人類健康，必須及時準(zhǔn)確地檢測病毒。然而，病毒非常“狡猾”，時常發(fā)生變異，逃過人類檢測，繼續(xù)肆意生長。12日，記者從山東農(nóng)業(yè)大學(xué)獲悉，該校李向東教授團隊近日制備了一種單克隆抗體，被稱為“雞尾酒”，意為可以像雞尾酒一樣將兩個單克隆抗體混合起來，讓所有攜帶特異性目標(biāo)病毒的檢測對象無一遺漏。
6月《植物生物技術(shù)雜志》在線發(fā)表上述成果。該成果可應(yīng)用于動植物病毒所有分離物的檢測，比如對新冠病毒的檢測，可杜絕漏檢現(xiàn)象。
基于抗體抗原識別的血清學(xué)方法在病原病毒檢測中至關(guān)重要，而抗體識別的是病毒的抗原決定簇。人們采用的抗體分為多克隆抗體和單克隆抗體。多克隆抗體含有多個抗原決定簇的抗體，而不同病毒可能有相同或相似的抗原決定簇，因而多克隆抗體可能會與非靶標(biāo)病毒發(fā)生交叉反應(yīng)，很容易出現(xiàn)錯檢。比如曾經(jīng)出現(xiàn)過健康人被告知感染某種病毒的誤診。
單克隆抗體就是單一的B細胞（漿細胞），能夠分泌出相對高度均一且針對某個特定抗原表型的抗體，并且為人工培養(yǎng)。單克隆抗體只是針對某一個抗原決定簇，因而特異性更高。但因為病毒有多個抗原決定簇，而有些單克隆抗體只能檢測到部分病毒分離物，就導(dǎo)致了漏檢現(xiàn)象發(fā)生。
馬鈴薯Y病毒是馬鈴薯Y病毒屬的代表種，主要侵染馬鈴薯、煙草、辣椒、番茄等茄科作物，嚴(yán)重影響作物產(chǎn)量和品質(zhì)。之前研究表明，利用國際上廣泛使用的馬鈴薯Y病毒單克隆抗體檢測馬鈴薯Y病毒分離物，最高時可能出現(xiàn)48.57%漏檢現(xiàn)象。因為馬鈴薯主要靠種薯進行繁殖，漏檢越多，會讓許多帶病種薯或種苗流向田間和市場，導(dǎo)致病毒病嚴(yán)重發(fā)生。
李向東教授團隊制備了54個馬鈴薯Y病毒的單克隆抗體，通過刪除突變以及丙氨酸掃描等分析明確了這些單克隆抗體所識別的抗原決定簇，篩選到了4個單克隆抗體，它們所識別的抗原決定簇與國際上廣泛使用的馬鈴薯Y病毒單克隆抗體不同，而且在馬鈴薯Y病毒衣殼蛋白中相對保守，其中3個單克隆抗體能檢測到更多的馬鈴薯Y病毒分離物。
他們通過科學(xué)組合識別不同抗原決定簇的單克隆抗體，得到了類似雞尾酒的兩種單克隆抗體的組合，它們可檢測的馬鈴薯Y病毒分離物有互補性，能檢測所有已知的1885個PVY分離物，實現(xiàn)所有馬鈴薯Y病毒分離物的全覆蓋檢測。對于新出現(xiàn)的株系，也可根據(jù)其衣殼蛋白氨基酸序列來判斷是否能用這個組合來檢測。
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